植物雙分子熒光互補(bǔ)(BimolecularFluorescent Complimentary,BiFC)
BIFC技術(shù)是指通過共表達(dá)兩個目的基因,如該基因能產(chǎn)生相互作用而產(chǎn)生親和力,通過親和力會拉近與其相連的熒光蛋白,組成完整的YFP熒光蛋白基因,通過YFP熒光位置來證明蛋白質(zhì)相互作用的發(fā)生及其空間位置。
當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)A與蛋白質(zhì)B在細(xì)胞內(nèi)發(fā)生相互作用時,它們各自的熒光蛋白片段也會隨之靠近,形成完整的熒光蛋白構(gòu)象。這種構(gòu)象恢復(fù)使得熒光蛋白能夠發(fā)出特征熒光,從而在顯微鏡下可視化地反映出蛋白質(zhì)A與B的相互作用。、武漢貝科新肽科技有限公司采用pSPYCE-35s和pSPYNE-35s載體每年完成幾十對基因檢測。
植物蛋白互作實驗
我們采用pSPYCE-35s和pSPYNE-35S載體,分別克隆A和B目的基因,同時進(jìn)行煙草瞬時表達(dá),如兩個蛋白互作,基因會相互作用而產(chǎn)生親和力,通過基因親和力會拉近與其相連的熒光蛋白,組成完整的YFP熒光蛋白,通過YFP熒光蛋白的位置來證明蛋白相互作用的發(fā)生及其空間位置。
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