科普：藥物代謝物液質(zhì)聯(lián)用檢測的體外代謝模型有哪些？

藥物代謝物液質(zhì)聯(lián)用檢測的體外代謝模型

在藥物研發(fā)中，預測藥物在人體內(nèi)的代謝途徑和產(chǎn)物至關重要。液質(zhì)聯(lián)用技術（LC-MS/MS）憑借其高靈敏度、高選擇性和強大的定性定量能力，成為檢測藥物及其代謝物的金標準。而可靠的體外代謝模型是生成這些代謝物以供檢測的關鍵前置步驟。常用的體外模型包括：

1. 肝微粒體： 最常用、最成熟的模型。通過超速離心從肝臟（人、大鼠、犬等）中分離出富含藥物代謝酶（尤其是CYP450酶和UGTs）的微粒體組分。其優(yōu)勢在于制備相對簡單、成本較低、酶活性穩(wěn)定、易于實現(xiàn)高通量篩選，特別適合研究I相代謝（氧化、還原等）和部分II相代謝（如葡萄糖醛酸化）。

2. 肝細胞： 使用新鮮分離的、凍存的或原代培養(yǎng)的肝細胞（人或動物來源）。肝細胞保留了完整的細胞結(jié)構(gòu)、所有代謝酶（I相和II相）以及輔因子和轉(zhuǎn)運體，能更全面地模擬肝臟的生理代謝環(huán)境，尤其適用于研究涉及多個酶步驟或需要完整細胞功能的代謝途徑。但培養(yǎng)難度和成本較高，活性維持時間有限。

3. 肝S9組分： 包含肝微粒體和胞質(zhì)溶膠成分，因此同時含有I相酶（主要在微粒體）和重要的II相酶（如谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶GSTs、磺基轉(zhuǎn)移酶SULTs，在胞質(zhì)溶膠）。它是研究同時涉及I相和II相代謝的便捷折中方案。

4. 重組表達代謝酶： 利用基因工程表達單一的人源代謝酶（如特定CYP450同工酶、UGT）。主要用于研究特定酶對藥物的代謝作用，明確代謝途徑歸屬，或評估藥物-藥物相互作用潛力。其“純凈”背景排除了其他酶系的干擾。

廣州中森檢測的肝微粒體法應用

廣州中森檢測在體外藥物代謝研究領域，尤其在肝微粒體體外代謝模型結(jié)合LC-MS/MS檢測方面具備成熟技術和豐富經(jīng)驗。其服務流程通常包括：

1. 孵育體系建立： 使用人或特定動物（如大鼠、犬）來源的高質(zhì)量肝微粒體，在優(yōu)化的緩沖液體系中加入輔因子（如NADPH用于I相代謝，UDPGA用于葡萄糖醛酸化反應）和目標藥物。

2. 孵育反應： 在嚴格控制的時間（通常數(shù)分鐘到數(shù)小時）和溫度（通常37°C）下進行代謝反應。

3. 反應終止與樣品處理： 加入終止液（如含內(nèi)標的乙腈或甲醇）終止反應，沉淀蛋白，離心取上清液進行LC-MS/MS分析。

4. LC-MS/MS檢測： 利用高效液相色譜（HPLC/UHPLC）分離藥物原型及代謝物，通過高分辨或三重四極桿質(zhì)譜進行高靈敏度、高特異性的檢測和結(jié)構(gòu)鑒定/定量分析。

廣州中森檢測憑借標準化的操作流程、符合GLP規(guī)范的質(zhì)量管理體系以及專業(yè)的分析團隊，能夠為客戶提供準確、可靠的肝微粒體體外代謝研究數(shù)據(jù)，為藥物早期代謝特征評估、代謝物鑒定、代謝穩(wěn)定性篩選及潛在藥物相互作用研究提供關鍵支持。