新手用多聚甲醛：這 5 個(gè)基礎(chǔ)誤區(qū)先避開(kāi)！

新手用多聚甲醛：這 5 個(gè)基礎(chǔ)誤區(qū)先避開(kāi)！

多聚甲醛（PFA）是實(shí)驗(yàn)室常用的組織固定劑，但其毒性（致癌、致敏）和操作復(fù)雜性不容忽視。新手操作時(shí)務(wù)必警惕以下5個(gè)關(guān)鍵誤區(qū)：

誤區(qū) 1：防護(hù)不足，輕視其毒性

* 錯(cuò)誤表現(xiàn)： 不戴防護(hù)眼鏡、N95口罩或防毒面具，僅用普通一次性手套，甚至在普通實(shí)驗(yàn)臺(tái)上操作。

* 風(fēng)險(xiǎn)： 吸入甲醛蒸氣刺激呼吸道、損傷眼睛；皮膚接觸引發(fā)過(guò)敏或灼傷。

* 正確做法： 務(wù)必在通風(fēng)櫥內(nèi)操作！ 全程佩戴防護(hù)眼鏡、N95口罩（或防有機(jī)蒸汽的防毒面具）、耐化學(xué)品手套（如丁腈手套）并穿實(shí)驗(yàn)服。

誤區(qū) 2：通風(fēng)不良，毒氣彌漫

* 錯(cuò)誤表現(xiàn)： 在普通實(shí)驗(yàn)臺(tái)或通風(fēng)不佳的區(qū)域稱量粉末或加熱溶解多聚甲醛。

* 風(fēng)險(xiǎn)： 甲醛蒸氣在室內(nèi)積聚，增加吸入風(fēng)險(xiǎn)。

* 正確做法： 所有涉及多聚甲醛粉末稱量、溶解、固定液配制及樣本固定的操作，必須在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行！ 確保通風(fēng)櫥氣流有效。

誤區(qū) 3：溶解不當(dāng)，濃度失效

* 錯(cuò)誤表現(xiàn)： 冷水溶解粉末（溶解極慢且不完全），或加熱至劇烈沸騰。

* 風(fēng)險(xiǎn)： 濃度不準(zhǔn)確影響固定效果；劇烈沸騰加速甲醛揮發(fā)，增加暴露風(fēng)險(xiǎn)。

* 正確做法： 加熱溶解是關(guān)鍵！ 在通風(fēng)櫥內(nèi)，將粉末加入預(yù)熱（約60°C）的緩沖液（如PBS）中，邊攪拌邊加熱至60-65°C（切勿沸騰），直至溶液變澄清透明，冷卻至室溫后使用。確保濃度準(zhǔn)確（常用4%）。

誤區(qū) 4：混淆儲(chǔ)存，固定液變質(zhì)

* 錯(cuò)誤表現(xiàn)： 將配制好的固定液（4% PFA）當(dāng)作“原液”長(zhǎng)期儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

* 風(fēng)險(xiǎn)： 固定液會(huì)緩慢解聚和降解，隨時(shí)間推移效果下降，且可能產(chǎn)生沉淀。

* 正確做法： 多聚甲醛粉末是“原液”形式。 配制好的固定液應(yīng)標(biāo)記濃度和日期，4°C避光保存，建議1-2周內(nèi)使用完畢。長(zhǎng)期儲(chǔ)存應(yīng)使用粉末。

誤區(qū) 5：固定過(guò)久，標(biāo)本受損

* 錯(cuò)誤表現(xiàn)： 認(rèn)為“固定越久越好”，將樣本浸泡在固定液中數(shù)天甚至數(shù)周。

* 風(fēng)險(xiǎn)： 過(guò)度交聯(lián)導(dǎo)致組織硬化、抗原表位遮蔽，嚴(yán)重影響后續(xù)染色（如免疫熒光、免疫組化）效果。

* 正確做法： 嚴(yán)格控制固定時(shí)間！ 大多數(shù)組織在4% PFA中于4°C固定 4-24小時(shí) 通常足夠。小塊組織或細(xì)胞固定時(shí)間更短（如30分鐘-2小時(shí)）。固定后務(wù)必用緩沖液（如PBS）充分漂洗去除殘留固定劑。

額外重點(diǎn)：廢物處理

* 錯(cuò)誤表現(xiàn)： 將含多聚甲醛的廢液直接倒入下水道。

* 風(fēng)險(xiǎn)： 污染環(huán)境，違反環(huán)保規(guī)定。

* 正確做法： 收集所有廢液！ 按照實(shí)驗(yàn)室規(guī)定，使用專用中和劑（如碳酸氫銨、多聚甲醛中和劑）中和處理，或作為危險(xiǎn)化學(xué)廢物交由專業(yè)機(jī)構(gòu)處置。

安全第一！ 操作多聚甲醛時(shí)，務(wù)必保持敬畏之心，嚴(yán)格遵守安全規(guī)程。避開(kāi)這些基礎(chǔ)誤區(qū)，是你實(shí)驗(yàn)成功和人身安全的重要保障。