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湖北原位雜交-武漢貝科新肽科技公司-染色體原位雜交

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雜交　（1）盛有2×SSC的塑料盤同，將干烤的濾膜飄浮在液面上，浸濕5分鐘。（2）將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起，放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿，原位雜交檢測，放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中，應(yīng)緩緩搖動濾膜，防止它們粘在一起。（3）用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細(xì)菌碎片，湖北原位雜交，以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強(qiáng)度和清晰度。（4）將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中，在適宜溫度（即在水溶液中雜交時用68℃，染色體原位雜交，而在50%甲酰胺中雜交時用42℃）下，預(yù)雜交1-2小時。

在研究DNA分子原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種技術(shù)。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結(jié)合，染色體熒光原位雜交，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，應(yīng)用帶有標(biāo)記的（有性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質(zhì)）DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測核酸（RNA或DNA）片段進(jìn)行雜交，然后可用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位

原位雜交法是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交，從而對特定核酸順序進(jìn)行定量定位的方法。原位雜交法可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。另有熒光原位雜交使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。

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